Per estudiar el cicle d'un bacteriòfag lític, s'infecta un cultiu d'E. coli amb pocs virus per bacteri, de manera que cada bacteri infectat rep com a molt un virus. Després es dilueix el cultiu perquè els virus nous no puguin infectar altres bacteris, i a diferents temps es compten les unitats formadores de plaques (UFP) en una gespa de bacteris. A cada temps es fan dos recomptes: un directament de la mostra (cada bacteri infectat i cada virus lliure fan una placa) i un altre després de tractar la mostra amb cloroform, que trenca els bacteris i allibera els virus ja acabats que hi ha a dins.
Sense cloroform: de 0 a 20 min, 1,0·105 UFP/mL; a 30 min, 6,0·106; de 40 min endavant, 1,5·107 UFP/mL.
Amb cloroform: de 0 a 10 min, menys de 102 UFP/mL; a 15 min, 1,0·106; a 20 min, 8,0·106; de 30 min endavant, 1,5·107 UFP/mL.
a) Explica per què, en els primers 10 minuts, el recompte amb cloroform és gairebé zero, si el cultiu està infectat. Com s'anomena aquest període i què passa dins la cèl·lula?
b) Calcula el nombre mitjà de virus alliberats per cada bacteri infectat (mida de l'esclat).
c) El recompte inicial es va obtenir sembrant 0,1 mL de la dilució 10−2 del cultiu a temps 0, que va fer 100 plaques. Comprova que és coherent amb 1,0·105 UFP/mL i raona per què no s'hauria sembrat directament el cultiu sense diluir.
d) Prediu i justifica com canviarien el període de latència i la mida de l'esclat si els bacteris fossin en fase estacionària en lloc de fase exponencial.
Pista 1
Un virus que ha injectat el seu àcid nucleic dins del bacteri ja no és una partícula infecciosa completa.
Pista 2
Compara el nombre de plaques al final amb el nombre de bacteris infectats al principi.
Pista 3
Concentració = plaques / (volum sembrat × factor de dilució). Per a d, pensa d'on treu el virus els ribosomes, els nucleòtids i l'ATP.