El test d'Ames detecta substàncies mutàgenes amb una soca de Salmonella que té una mutació en un gen de la síntesi de la histidina (his−) i, per tant, no creix en un medi sense histidina. Només hi formen colònies els bacteris en què una nova mutació restaura el gen (revertents). Com que algunes substàncies només són mutàgenes després de ser transformades pels enzims del fetge, es fa l'assaig sense i amb extracte hepàtic de rata (S9). Colònies revertents per placa (3 rèpliques):
• Sense S9: dissolvent sol 25, 28, 22; substància X (100 µg) 27, 24, 30; control conegut 2-aminoantracè 30, 27, 30.
• Amb S9: dissolvent sol 30, 26, 28; X (10 µg) 31, 29, 33; X (50 µg) 60, 55, 65; X (100 µg) 130, 120, 125; 2-aminoantracè 410, 395, 425.
Es considera que una substància és mutàgena si dobla, com a mínim, les revertents del dissolvent i té una relació dosi-resposta.
a) Per què apareixen colònies a les plaques del dissolvent sol? Quina informació donen?
b) Calcula les mitjanes i el quocient respecte del dissolvent per a cada condició de X. És mutàgena la substància X? En quines condicions?
c) Explica el paper del 2-aminoantracè a l'assaig i què indica el seu resultat sense S9.
d) Relaciona els resultats amb el paper del reticle endoplasmàtic llis de les cèl·lules hepàtiques i raona per què una substància d'aquest tipus podria augmentar el risc de càncer en humans.
Pista 1
Les mutacions apareixen espontàniament a una certa freqüència, encara que no hi hagi cap mutagen.
Pista 2
Divideix la mitjana de cada tractament per la del dissolvent de la mateixa sèrie (sense S9 o amb S9).
Pista 3
Els enzims hepàtics de detoxificació fan les molècules més solubles, però de vegades les converteixen en més reactives.